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反相填料是以硅膠為基質,表面鍵合極性較弱官能團的鍵合相,常用類型包括C18、C8、C4、苯基柱等,其核心原理是通過疏水相互作用實現分子分離,廣泛應用于藥物分析、生命科學及工業制備領域。反相填料核心組成:基質材料以高純度硅膠為基質,通過化學修飾(如鍵合烷基鏈、苯基等)形成疏水性表面。例如:C18填料:鍵合18個碳原子的長鏈烷基,疏水性強,適用于非極性到中等極性化合物(如抗生素、類固醇)的分離。C8填料:鍵合8個碳原子的短鏈烷基,疏水性較弱,保留能力低于C18,但分離速度更快,適...
大孔吸附樹脂的操作要點涵蓋吸附、解吸、再生及安全防護等多個環節,需根據目標物質性質和樹脂類型精細調控。一、吸附操作要點樹脂預處理清洗:用乙醇浸泡樹脂24小時,去除雜質和氣泡,再用蒸餾水洗至無醇味。活化:根據樹脂極性選擇預處理方式:非極性樹脂:用丙酮或甲醇浸泡后,水洗至中性。極性樹脂:用酸(如5%HCl)或堿(如5%NaOH)交替浸泡,水洗至中性。上樣液準備濃度控制:上樣液濃度通常為0.1-1g/mL,濃度過高易導致樹脂堵塞,過低則效率低。pH調節:根據目標物質極性調整pH值:...
凝膠過濾柱又稱分子篩層析柱或尺寸排阻層析柱,是一種基于分子大小差異進行分離的層析技術核心工具。凝膠過濾柱的應用場景:蛋白質純化:去除雜蛋白、收集特定分子量范圍的組分。示例:Superdex75Increase10/300GL適用于重組標簽蛋白的制備純化。脫鹽與緩沖液置換:分離大分子(如蛋白質)與小分子(如鹽離子)。常用凝膠:SephadexG-10、G-25。分子量測定:通過標準品繪制分子量標準曲線,測定未知樣品的分子量。病毒與疫苗純化:分離病毒顆粒與細胞碎片,如Supero...
高效封閉液是實驗中常用的試劑,主要用于減少非特異性結合,提升實驗結果的準確性和信噪比。其使用方法因產品類型和實驗體系的不同而有所差異,但通常遵循一套標準化的流程。一、使用前的準備選擇合適的封閉液:根據實驗類型(如Westernblot、免疫熒光、免疫組化等)和膜的類型(如PVDF膜、NC膜等)選擇合適的高效封閉液。常見的封閉液類型包括BSA(牛血清白蛋白)封閉液、脫脂奶粉封閉液、即用型快速封閉液等。即用型快速封閉液因其操作便捷、封閉時間短而越來越受歡迎。準備實驗材料:確保轉印...
凝膠色譜柱是一種重要的色譜分離工具,廣泛應用于分子量分離、生物大分子純化以及高分子材料分析等領域。它基于凝膠滲透原理,通過柱內填充的多孔凝膠介質,實現對不同分子大小的分離。一、工作原理凝膠色譜柱的分離原理基于“分子篩效應”或稱“排阻效應”。當待分離的樣品溶液流經填充有多孔凝膠的柱子時,不同分子大小的組分在通過柱床時表現出不同的通行路徑和速度。1、大分子:由于分子尺寸較大,無法進入凝膠顆粒的孔隙,只能繞過凝膠顆粒表面,因此其流動路徑較短,容易較快通過柱子,較早洗脫。2、中等大小...
OJ-H手性柱核心解析:關鍵性能參數物理參數填料粒徑:5μm(H系列)與10μm(傳統型),5μm型號柱效更高、分辨率更優。柱長與內徑:提供150mm(快速分析)、250mm(標準分析)及半制備柱(10-50mm內徑),支持從微克級到克級制備。pH范圍:2.0-7.5,耐受弱酸性至中性條件。溫度范圍:0-40℃,需避免高溫導致填料降解。壓力限制:5μm填料:建議操作壓力≤5MPa,最高耐壓30MPa。10μm填料:建議操作壓力≤3MPa,最高耐壓10MPa。流動相兼容性正相模...
凝膠色譜柱廣泛應用于蛋白質、酶、核酸、多糖等復雜生物大分子的分離純化及結構表征,是生物化學、生物物理、生物醫學等學科中重要的工具。具體應用包括:生物大分子的分離與純化:蛋白質和多肽:可有效分離不同分子量、等電點和疏水性的蛋白質與多肽。如在蛋白質組學研究中,用于分離復雜的蛋白質混合物,以鑒定和分析特定蛋白質;在生物制藥生產中,對重組蛋白、單克隆抗體等進行純化精制,去除雜質蛋白、多肽等。核酸:適用于分離DNA、RNA及其片段,對于研究核酸的結構、功能、代謝以及基因工程等領域具有重...
選擇合適的反相c18色譜柱是液相色譜分析中至關重要的一步,它廣泛應用于各種化合物的分離,尤其適用于非極性或低極性化合物的分析。其選擇不僅關系到分離效果,還直接影響到分析的準確性、重現性和實驗效率。以下是選擇合適反相c18色譜柱時需要考慮的幾個關鍵因素。1、柱長與內徑柱長和內徑是影響色譜分離的兩個重要參數。柱長決定了分離的效率,通常柱長越長,分離效果越好,但樣品分析時間會相應增加。柱內徑則影響樣品的加載量和流速,內徑越大,樣品的加載量越多,但對于高分辨率分離來說,較小內徑的柱子...
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